今天为大家介绍的文章是发表于《Molecular Cancer》的《The chemokine receptor CXCR7 interacts withEGFR to promote breast cancer cell proliferation》，影响因子10.679，作者是美国佛罗里达州迈阿密米勒医学院的Nicole Salazar等人。
趋化因子及其受体在肿瘤生长、化疗后存活和器官特异性转移中起着重要作用。CXC趋化因子受体-7(CXCR 7)是与癌症有关的最新趋化因子受体。虽然在乳腺癌细胞系和肿瘤组织中过度表达，但其在乳腺癌(BrCa)生长和转移中的作用机制尚不清楚。该文中研究者采用实时定量PCR（q-PCR）、增殖试验、免疫组化和免疫印迹技术，研究了CXCR7在BrCa细胞增殖中的作用。QPCR检测CXCR 7特异性cDNA和siRNA转染及表达水平的表型变化。此外，通过Western blotting、免疫荧光和原位邻近连接试验，研究了CXCR 7与表皮生长因子受体(EGFR)的关系及对其活性的调节作用。
1、CXCR7在乳腺癌细胞系中表达，过度表达CXCR 7导致细胞增殖增加
表1.相对于PPIA(FD)的CXCR 7和CXCR 4 mRNA水平
图1. 通过免疫荧光和Western印迹分析在BRCA细胞系中验证CXCR7表达。
分析：
由表1可知：与正常乳腺上皮细胞系MCF12A或MCF10A相比，CXCR 7在已建立的BRCA细胞系中被认为表达过高(>2倍)。CXCR 7在雌激素受体阳性(ER)(MCF 7，T47D，BT 474和HCC 202)和雌激素受体阴性(ER-)(HCC 1954，HCC 1569)细胞中均有表达。CXCR7在ER+管腔细胞中表达最高。由图1可知，正常上皮细胞系MCF12a相比，乳腺癌细胞系MCF7和BT474在mRNA和蛋白质水平上表现出最高的CXCR7表达。T47D和SKBR 3细胞中未见CXCR 7蛋白表达。EGFR蛋白的表达与CXCR 7蛋白的表达进行比较。T47D和SKBR 3细胞中未检测到EGFR，所有BRCA细胞系均表达CXCR 4。
2、CXCR 7调节细胞周期机制
图2 .MCF7细胞的CXCR7消耗影响乳腺癌细胞增殖
分析：
CXCR7下调调节导致参与调节细胞周期的关键蛋白质的显着变化，与对照siRNA转染细胞相比，siCXCR7MCF7细胞中G0/G1分数显着增加（33%）和S相分数显着降低；CXCR 7细胞增殖指标Cyclin B1和Cdk 4降低，S期抑制蛋白p21显着增加。
3、CXCR 7的配体无关效应
图3 CXCR 7配体独立效应
分析：
未处理与ITAC或SDF-1a处理的培养物之间细胞数量没有明显增加，ITAC刺激仅轻微降低增殖；在对照细胞中，EGF刺激的细胞与非刺激细胞的增殖显着增加；在阳性对照、雌激素(E2)或雌激素与表皮生长因子(E2)联合处理的培养中，生长明显增强；SDF-1a的下调对细胞增殖无明显影响；4-IPP抑制了所有被测细胞系的生长.， 然而，4-IPP细胞毒性与cxcr 7的表达无关。
4、CXCR7与人乳腺癌细胞系MCF7和乳腺癌组织中的CD-31和EGFR联合定位
图4 CXCR 7与EGFR共定位.
分析：在EGF刺激2-5分钟后，CXCR7-EGFR共定位显着增加；CXCR 7和EGFR在乳腺癌组织中与正常乳腺组织有很强的共同定位；与正常乳腺组织相比，人ER+乳腺癌组织中CXCR7-EGFR的增加；研究者使用Ma乳腺4数据库分析表明，CXCR 7在乳腺癌组织间质中的表达高于正常乳腺组织间质。
5、CXCR 7下调MCF 7细胞p-ERK和p-EGFR水平
图5β-arrestin2在CXCR7介导的EGFR和ERK磷酸化中起作用
分析：
siRNA对CXCR 7的抑制作用降低EGF(10 ng/mL，2 min)ERK 1/2磷酸化水平；与对照siRNA转染细胞相比，CXCR 7下调了Tyrosine1110细胞EGFR的活化；Neath印迹下条状图中EGFRY 1110/EGFR总比值的定量显示；β-AR2过表达细胞在Y 1110时ERK 1/2和EGFR磷酸化增强；然而，随着CXCR 7的下调，我们观察到ERK 1/2和EGFRY 1110在β-ar2过度表达后磷酸化显着下降；EGFR高表达细胞与未转染细胞相比，CXCR 7-EGFR共定位显着增加；而siRNA介导的β-AR2在EGFR高表达MCF 7细胞中的敲除导致几乎完全丢失CXCR 7-EGFR共定位；同样地，通过siRNA下调CXCR7作为对照，CXCR7 EGFR着色化显着降低。
结论： 这些结果表明CXCR 7与EGFR偶联调控BRCA细胞的增殖，提示CXCR 7在BRCA生长中具有重要的配体无关作用。因此，CXCR7-EGFR轴是乳腺癌治疗的有前景的靶点
